酵母應(yīng)在低溫、缺氧和缺水的條件下保藏,以降低其新陳代謝作用,減少不必要的生長(zhǎng),防止酵母的退化、變異、死亡。
酵母菌種保藏的方法有:
(1)固體菌種保藏:將要保藏的酵母接種在麥汁瓊脂培養(yǎng)基或MYGP瓊脂培養(yǎng)基斜面上,25℃保溫培養(yǎng)2-3天,待酵母繁殖成菌落,經(jīng)檢查無(wú)雜菌污染后,即放入4℃冰箱中。每年移種3-4次。過(guò)度繁地移種,會(huì)增加菌種變異的機(jī)會(huì)。這是啤酒廠平時(shí)使用菌種的保藏方法。為了不使培養(yǎng)基的水分蒸發(fā),可將試管口改用滅菌的橡皮塞塞緊,但作為長(zhǎng)期保存仍不適宜。
(2)液體石蠟面保藏:在生長(zhǎng)成熟的酵母斜面試管中,加入已滅菌、不含水分的液體石蠟,防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā),隔絕與空氣的接觸,然后置于2-4℃下保存。該法的主要缺點(diǎn)是酵母會(huì)吸附液體石蠟中的臟物質(zhì),保藏一段時(shí)間后,酵母顏色易變深。
(3)液體試管保藏(蔗糖溶液保藏):將要保藏的酵母菌種放入10%蔗糖溶液中,在25℃保溫培養(yǎng)24小時(shí)候,置于4℃冰箱中,每年移種2-3次。酵母在此條件下可以存活,因無(wú)氮源,不能生長(zhǎng),其變異率也低。
(4)真空冷凍干燥保紅藏:此法適合于大量菌種保藏。經(jīng)過(guò)冷凍干燥的菌種,失去了代謝作用所必須的水分、氧氣和適宜的溫度,氣變異率低于斜面保藏。保藏期長(zhǎng),但在制備冷凍干燥菌種時(shí),酵母容易死亡,存活率低。
(5)液氮保藏:將酵母細(xì)胞冷卻,在-70℃下保藏,酵母的存活率遠(yuǎn)高于真空冷凍干燥法,可達(dá)到80%以上,變異率極低。這是目前保藏酵母原菌的更好方法。
啤酒廠生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)保藏酵母菌的方法有:
(1)漢生罐保藏法
目前多數(shù)啤酒采用這種方法。純種酵母擴(kuò)大培養(yǎng)至漢生罐后,分割大部分(85%左右)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),剩余酵母再添加滅菌麥汁,10-12℃通風(fēng)培養(yǎng),達(dá)到高泡期后,冷卻至2-4℃酵母作為保存酵母用。此保藏的酵母應(yīng)定期檢查,并每月更換新麥汁。
漢生罐保藏法實(shí)用易行,主要優(yōu)點(diǎn)在于:能節(jié)約時(shí)間,減少了實(shí)驗(yàn)室階段復(fù)雜的分離培養(yǎng)工作;菌種保藏方便,可隨時(shí)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng);將酵母長(zhǎng)期馴養(yǎng)在現(xiàn)場(chǎng)麥汁中,對(duì)保持發(fā)酵質(zhì)量和口味一致性較有利。如果發(fā)現(xiàn)保藏酵母有衰退和變異現(xiàn)象,或污染雜菌時(shí),應(yīng)棄之不用,另外培養(yǎng)酵母.
(2)酵母泥的保藏
傳統(tǒng)方法將洗凈過(guò)篩的酵母泥浸泡在0.5~2℃的無(wú)菌水中,每天換水2-3次,最多保存2-3天?,F(xiàn)代啤酒廠對(duì)增設(shè)酵母泥回收罐,罐內(nèi)備有攪拌器和夾套冷卻設(shè)施,回收酵母后冷卻至(4℃),不洗滌,1-2天內(nèi)實(shí)用?;蛸A藏大量泥狀酵母,保藏期可達(dá)2周以上。
(3)壓榨酵母保藏法
將酵母泥洗滌、壓榨去水,破碎成小塊,置于淺盤,于低溫保藏。壓榨時(shí)必須保持低溫(2-4℃)和無(wú)菌。壓榨酵母使用時(shí),先調(diào)成泥狀再加入麥汁中。此法容易污染,一般已很少采用。酵母泥遠(yuǎn)距離運(yùn)輸可用此法。
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